規(guī)格1:20ml 價(jià)格1:¥320
規(guī)格2:50ml 價(jià)格2:¥680
規(guī)格3:100ml 價(jià)格3:¥1320
SKU: RC0005Category: 細(xì)胞裂解液Tags: Cell Culture
產(chǎn)品概述
從細(xì)胞或組織中提取到完整的蛋白質(zhì)樣品是影響免疫印跡分析(Western blotting,WB)得到真實(shí)可靠結(jié)果的關(guān)鍵因素之一。在實(shí)際操作中,從細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞器及細(xì)胞核中提取蛋白質(zhì)通常采用去污劑緩沖液(如 RIPA 緩沖液)和/或物理破碎(如超聲處理)的方法;尤其是含有 0.1% SDS 的RIPA 緩沖液或其替代品(如不含 SDS 的 NP-40 緩沖液)已作為一種標(biāo)準(zhǔn)方法被廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織的裂解。事實(shí)上,RIPA 可以有效溶解和提取分子量小于 90 kDa 的中、小分子的絕大部分的蛋白質(zhì),但其對于分子量大于 90 kDa 的大分子蛋白質(zhì)功效不大。為了更有效地提取到大分子蛋白,許多實(shí)驗(yàn)室會(huì)將 RIPA 緩沖液和超聲處理結(jié)合使用,通過超聲打斷 DNA,從而降低裂解液的粘稠度。然而,超聲處理會(huì)破壞大分子蛋白。此外,為了保證蛋白質(zhì)在提取的過程中不被細(xì)胞本身的蛋白酶降解和蛋白酶去修飾,各種蛋白酶抑制劑和特異的酶抑制劑要加到RIPA 緩沖液中。例如,為了減少蛋白質(zhì)的降解,需要將蛋白酶抑制劑如 PMSF 添加到 RIPA 緩沖液中;同樣,為了抑制磷酸酶活性,需加入氟化鈉和正釩酸鈉。即便如此,翻譯后修飾的蛋白信號(hào)還是不能得到有效的保護(hù)。
本試劑盒產(chǎn)品解決了以上問題和缺陷。它可以快速完整的提取細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì),并有效保護(hù)蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾,可以取代現(xiàn)有的 RIPA 及其衍生的緩沖液,具有通用性好、應(yīng)用廣泛、實(shí)用高效等優(yōu)點(diǎn),同時(shí),該裂解試劑盒在提取蛋白質(zhì)時(shí)無需額外添加蛋白酶、 磷酸酶以及其它酶抑制劑,無需超聲波處理,不僅可以完整提取分子量大于 90kDa 的大分子蛋白質(zhì), 而且對小于 90kDa 的蛋白質(zhì)分子應(yīng)用同樣有效,大大簡化了實(shí)驗(yàn)流程,節(jié)約時(shí)間和材料成本,從而在源頭上為下游的蛋白質(zhì)分析提供了優(yōu)質(zhì)完整的蛋白質(zhì)樣品。
產(chǎn)品組分
規(guī)格 |
組分A |
組分B |
RC0005-S |
40 μL |
20 mL |
RC0005-M |
100 μL |
50 mL |
RC0005-L |
200 μL |
100 mL |
產(chǎn)品特性
1.無需添加蛋白酶或其他酶抑制劑或超聲處理。
2.只需混合試劑 A 和 B;提取過程僅需 15 分鐘。
3.接近完整地抽提大分子蛋白質(zhì);無超聲處理,避免蛋白質(zhì)片段化。
4.保護(hù)蛋白質(zhì)翻譯后修飾(如磷酸化、糖基化、泛素化、甲基化和乙?;o損失。
5.適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織的提取。
產(chǎn)品儲(chǔ)存
試劑 A 存放于-20°C 冷凍條件,試劑 B 存放于室溫或 4°C 冷藏條件。
注:若試劑 B 在 4°C 下長時(shí)間保存,可能會(huì)出現(xiàn)沉淀,這不影響產(chǎn)品質(zhì)量。當(dāng)移至室溫下,沉淀會(huì)重新溶解。
產(chǎn)品應(yīng)用
變性蛋白的提??;免疫印跡分析